Téma: Pôvodné práce

Molekulárna detekcia Pantonovho-Valentinovho leukocidínu v klinických izolátoch Staphylococcus aureus

Oliver Pešát, Daniela Ohlasová, Lívia Ovšonková, Karol Samek, Lenka Vallušová

Úvod: Pantonov-Valentinov leukocidín (PVL) je extracelulárny faktor virulencie pri Staphylococcus aureus a jeden z mnohých, ktoré S. aureus môže produkovať. Toxín dokáže vytvárať póry v membránach leukocytov, čo vedie k ich lýze až nekróze. Produkcia PVL toxínu je asociovaná so závažnými ochoreniami ako nekrotizujúca pneumónia, ale aj závažnými infekciami kože a mäkkých tkanív.
Cieľ: Zaviesť detekciu PVL do rutinnej praxe na oddelení klinickej mikrobiológie Nemocnice Poprad, a. s. a takisto zmapovať výskyt PVL pozitívnych kmeňov S. aureus vo vybraných suspektných vzorkách.
Súbor pacientov a metódy: Bolo analyzovaných vybraných 313 klinických izolátov S. aureus pochádzajúcich zo spektra vzoriek pacientov vyšetrovaných na oddelení klinickej mikrobiológie Nemocnice Poprad, a. s. Všetky vzorky boli podrobené RT-PCR testu komerčne dostupnou súpravou na detekciu génu lukS-PV kódujúceho PVL a zároveň na detekciu mecA génu kódujúceho rezistenciu proti β-laktámovým antibiotikám. Zároveň boli PVL pozitívne vzorky podrobené testu minimálnej inhibičnej koncentrácie (MIC) na vybrané antimikrobiálne látky.
Výsledky: Zo všetkých 313 vyšetrených izolovaných kmeňov S. aureus bolo 75 (23,96 %) RT-PCR pozitívnych na prítomnosť génu kódujúceho PVL. Gén mecA bol zistený v 177 (56,55 %) izolátoch. Išlo najmä o izoláty z rán, kožných ložísk, abscesov a hemokultúr. Z PVL pozitívnych kmeňov bolo až 67 (89,33 %) MRSA. Testovaním MIC bola pri PVL pozitívnych izolátoch zistená nasledovná citlivosť na vybrané antimikrobiálne látky: linezolid – 100 % citlivých izolátov, klindamycín 82,66 % citlivých a 17,33 % rezistentných (započítaná bola aj skrížená indukovaná a konštitutívna makrolidová, linkozamidová, streptogramínová rezistencia), vankomycín – 100 % citlivých. Priemerný vek pacientov s PVL pozitívnym S. aureus bol takmer 22 rokov a medián veku približne 6 rokov.
Záver: Detekcia génu kódujúceho PVL toxín má význam z hľadiska klinického obrazu a liečby infekcie S. aureus. Aktuálne nie je v Slovenskej republike venovaná dostatočná pozornosť PVL toxínu a jeho testovanie sa rutinne nevykonáva. Z toho dôvodu sme pristúpili k zavedeniu rutinného testovania metódou RT-PCR na prítomnosť génu lukS-PV. Nami získané dáta môžu pomôcť získať lokálny prehľad o PVL pozitivite v rámci populácie, pretože dáta k tejto problematike na Slovensku takmer neexistujú.

Molecular detection of Panton-Valentin leukocidin in clinical isolates of Staphylococcus aureus
Introduction: Panton-Valentin leukocidin (PVL) is an extracellular virulence factor in Staphylococcus aureus and one of many that S. aureus can produce. The toxin can create pores in leukocyte membranes, leading to their lysis or necrosis. The production of PVL toxin is associated with severe diseases such as necrotising pneumonia and serious infections of the skin and soft tissues.
Goal: To introduce PVL detection into routine practice at the Department of Clinical Microbiology of the Poprad Hospital, a.s. with and map the occurrence of PVL-positive strains of S. aureus in selected suspect samples.
Patient set and methods: Selected 313 clinical isolates of S. aureus from the spectrum of patient samples examined at the Department of Clinical Microbiology of the Poprad Hospital were analyzed. All samples were subjected to an RT-PCR test with a commercially available kit to detect the lukS-PV gene encoding PVL and, simultaneously, detect the mecA gene encoding resistance against β-lactam antibiotics. At the same time, PVL-positive samples were subjected to the minimum inhibitory concentration (MIC) test for selected antimicrobial substances.
Results: Out of all 313 examined isolated strains of S. aureus, 75 (23.96%) were RT-PCR positive for the presence of the gene encoding PVL. The mecA gene was detected in 177 (56.55%) isolates. These were mainly isolates from wounds, skin lesions, abscesses, and blood cultures. Of the PVL-positive strains, up to 67 (89.33%) were MRSA. MIC testing revealed the following sensitivity to selected antimicrobial substances in PVL-positive isolates: linezolid – 100% of sensitive isolates, clindamycin 82.66% sensitive and 17.33% resistant (cross-induced and constitutive macrolide, lincosamide, streptogramin resistance was also taken into account), vancomycin – 100% sensitive. The mean age of patients with PVL-positive S. aureus was nearly 22 years, and the median was approximately 6 years.
Conclusion: Detecting the gene encoding PVL toxin is essential in the clinical picture and treatment of S. aureus infection. Currently, sufficient attention is not paid to the PVL toxin in the Slovak Republic, and its testing is not routinely performed. For this reason, we proceeded to introduce routine testing using the RT-PCR method for the presence of the lukS-PV gene. The data we obtained can help obtain a local overview of PVL positivity within the population because there is almost no data on this issue in Slovakia.
Keywords: PVL, Pantonov-Valentinov leukocidin, Staphylococcus aureus, MRSA, Methicillin-resistant Staphylococcus aureus

Ročník 2024  Témy časopisu Pediatria 4 / 2024

PREDSEDA
prof. MUDr. Peter Bánovčin, CSc. (Martin, SR)

PODPREDSEDA
prof. MUDr. Miloš Jeseňák, PhD., MBA (Martin, SR)

ČLENOVIA
doc. MUDr. Mario Barreto, PhD. (Rím, Taliansko)
doc. MUDr. Vladimír Bzdúch, CSc. (Bratislava, SR)
dr n.med. Joachim Buchwald (Rabka, Poľsko)
doc. MUDr. Milan Dragula, CSc., mim. prof. (Martin, SR)
MUDr. Peter Ďurdík, PhD. (Martin, SR)
doc. MUDr. Katarína Furková, CSc., mim. prof. (Bratislava, SR)
prof. dr. med. Janusz Haluszka (Krakow, Poľsko)
doc. MUDr. Zuzana Havličeková, PhD. (Martin, SR)
MUDr. Marian Hrebík, MPH (Bratislava, SR)
prof. MUDr. Hana Hrstková, CSc. (Brno, ČR)
prof. MUDr. Henrieta Hudečková, PhD., MPH (Martin, SR)
doc. MUDr. Ľubica Jakušová, PhD. (Martin, SR)
prof. MUDr. Alexandra Kolenová, PhD. (Bratislava, SR)
doc. MUDr. Ľudmila Košťálová, CSc. (Bratislava, SR)
prof MUDr. Karol Kralinský, PhD. (Banská Bystrica, SR)
prof. MUDr. Zuzana Krištúfková, PhD., MPH (Bratislava, SR)
doc. MUDr. Milan Kuchta, CSc., mim. prof. (Košice, SR)
prof. MUDr. Vladimír Mihál, CSc. (Olomouc, ČR)
doc. MUDr. Slavomír Nosáľ, PhD. (Martin, SR)
prof. MUDr. Petr Pohunek, CSc. (Praha, ČR)
MUDr. Elena Prokopová (Bratislava, SR)
prof. MUDr. Roman Prymula, CSc., Ph.D. (Hradec Králové, ČR)
MUDr. Zuzana Rennerová, PhD. (Bratislava, SR)
prof. MUDr. Tibor Šagát, CSc. (Bratislava, SR)
MUDr. Pavol Šimurka, PhD. (Trenčín, SR)
MUDr. Marta Špániková (Bratislava, SR)
doc. MUDr. Veronika Vargová, CSc. (Košice, SR)
prof. Maria Pia Villa, MD., PhD. (Rím, Taliansko)
prof. MUDr. Mirko Zibolen, CSc. (Martin, SR)

REDAKTORKA
Eva Stachová
e-mail: stachova@amedi.sk

GRAFICKÁ ÚPRAVA
Ing. Lukrecia Schiller
e-mail: dtp@amedi.sk

MANAŽÉR MARKETINGU, INZERCIE A PODUJATÍ
Ing. Dana Chodasová
mobil: 0904 272 258
e-mail: chodasova@amedi.sk

EKONOMIKA A PREDPLATNÉ
Ing. Martina Ďurčovič
mobil: 0911 117 949
e-mail: durcovic@amedi.sk

ODBORNÁ KOREKTÚRA
doc. MUDr. Milan Kuchta, CSc., mim. prof. 

JAZYKOVÁ KOREKTÚRA
Mgr. Eva Doktorová

KOREKTÚRA ANGLICKÝCH TEXTOV
Ing. Janka Bábelová, PhD.

 

RUBRIKY

Prehľadové práce
Najnovšie poznatky o etiológii, patogenéze, diagnostike a terapii chorôb a skupín ochorení.
Maximálny rozsah je 7 strán textu (typ písma Times New Roman, veľkosť písma 12, riadkovanie 1,5). Neupravujte text do stĺpcov - nezalamujte, tabuľky umiestnite na záver práce. Do článku použite najviac 6 obrázkov (grafov). Obrázky nevkladajte do Wordu, ale pošlite ich originálne súbory zvlášť vo formáte „.jpg“, grafy vytvárajte v programe Excel a posielajte ich originálne súbory zvlášť. V prípade spracovávania obsiahlejšej tematiky je možné po dohode s redakciou rozdeliť príspevok do niekoľkých častí. Článok píšte s dôrazom na jeho praktické využitie pre pediatrov.

Pôvodné práce
Pôvodná práca prináša vedecké spracovanie študovanej problematiky. Je rozdelená do obvyklých častí spolu so štruktúrovaným súhrnom. Ak ide o pôvodnú prácu, vyžaduje sa štruktúrovaný súhrn s piatimi časťami:
Východisko: Stručne (2 - 3 vety) uviesť poznatky, prípadne ich nedostatok, z ktorých autori vychádzali pri koncepcii práce. Súbor: Presne, číselnými hodnotami charakterizovať vyšetrovaný a kontrolný súbor (vek, pohlavie, vyšetrované vzorky, číselné hodnoty; pacienti nie sú materiál, ale súbor).
Metódy: Výstižne definovať použité metódy, prístroje a postupy. Súbor a metódy možno podľa potreby spojiť.
Výsledky: Uviesť najdôležitejšie konkrétne číselné výsledky, rozptyl štatistických hodnôt v konfrontácii s literatúrou.
Záver: Jasne uviesť nové poznatky, ktoré práca priniesla, a ich význam pre prax alebo rozvoj vedy. Na záver súhrnu treba uviesť Kľúčové slová v osobitnom riadku v rozsahu 3 - 6 slov.

Kazuistika
Maximálny rozsah je 5 strán. Členenie: úvod, abstrakt, vlastný prípad, diskusia, záver, literatúra.

Algoritmy diagnostiky a terapie
Diagnostika a terapia spracovaná v tabuľkách a schémach, s minimom textu, s dôrazom na stručnosť a prehľadnosť.

Rôzne
Reakcie na prehľadné články, novinky v oblasti diagnostiky, terapie, výsledky štúdií (max. 3 strany), správy z odb. podujatí, abstrakty z vedeckej práce publikovanej v zahraničnej tlači, nie staršej ako 1 rok. Rozsah max. 1 strana. Uveďte názov práce v slovenčine/češtine, autorov, pracovisko, ďalej názov práce v angličtine s úplnou citáciou.

Príloha - Medziodborová téma
Medziodborová téma spracovaná komplexne, ale stručne, prehľadne, zrozumiteľne (rozsah do 12 strán).

SPRACOVANIE RUKOPISU

Príspevok píšte na počítači v niektorom z bežných textových editorov.
- píšte na celú šírku riadkov (nepoužívajte klávesnicu ENTER na konci riadkov)
- neupravujte text do stĺpcov - nezalamujte, tabuľky umiestnite na záver práce
- rozlišujte dôsledne čísla 1, 0 a písmená l, O
- zátvorky sú vždy okrúhle ( )
- skratky vždy vysvetlite pri ich prvom použití

NÁLEŽITOSTI RUKOPISU

1. Výstižný názov práce, mená a priezviská všetkých autorov vrátane titulov, pracoviská autorov. Adresa prvého autora vrátane čísla telefónu, faxu a e-mailovej adresy.
2. Súhrn - štruktúrovaný obsah: úvod, ciele, metódy, výsledky, záver v rozsahu maximálne 10 riadkov, písať v 1. alebo 3. osobe jednotného alebo množného čísla (zjednotiť podľa typu článku).
3. Kľúčové slová - v rozsahu 3-6 (len pri prehľadových prácach a Prílohe - Medziodborová téma).
4. Anglický preklad: názov práce, súhrn, kľúčové slová (len pri Prehľadových prácach a Prílohe - Medziodborová téma)
5. Vlastný text
Do článkov písaných vo Worde nevkladajte obrázky, ale pošlite ich originálne súbory zvlášť vo formáte „.jpg“, grafy vytvárajte v programe Excel a posielajte ich originálne súbory samostatne. Pri posielaní fotodokumentácie poštou posielajte, prosím, len kvalitné originály. Každú prílohu označte číslom, pod ktorou je zmienená v texte. Text píšte v 1. alebo 3. osobe jednotného alebo množného čísla (zjednotiť podľa typu článku).
6. Literatúra
Citácie sú očíslované abecedne podľa priezviska prvého autora boldom, odkazy v texte sú uvádzané číslom citácie v okrúhlych zátvorkách. Uveďte maximálne 25 citácií, najmä z posledných 5. rokov.

Príklady citácií:
1. BRISCOE M.H.,CLARK T.J., SIMONCELI G.H., DEVILD P.S. Preparing scientificillustrations? A guide to better posters, presentations andpublications. 2nd ed. New York: Springer-Verlag, 1996, 217 pp.
2. BURNARD, P. Writing for publication: a guide for those who must. Nurse Educ Today, 17, 1999, p. 208-212.
3. CARROLL, L. Exploring genes and genetic disorders [online]. Nov. 2004 [cit. 2005-02-10]. Dostupné na internete:[http://www.germany.eu.net/books/alice/html].
4. ČERVEŇOVÁ O., POLÁK V., VICIANOVÁ K. Sríning a liečebné postupyanomálii uropoetického systému v novorodeneckom veku. Čs Pediat, 48, 1993, s. 233-236.
5. KOLLMANOVÁ S., BUBENÍKOVÁ L. Atlas medicínskych ilustrácii. 5. vyd. Martin: Osveta, 2001, 205 s.
6. OSBORNE B.E. The electrocardiogram of the rat. In: BUDDEN R.,DETWEIERD K., ZBINDEN G. The rat electrocardiogram in pharmacology and toxicology. Oxford: Pergamon Press, 1981, p. 15-27.

V citáciách za krstnými menami sú bodky. Za autormi je bodka. Za rokom vydania je bodka. Za skratkou strany p. alebo s. je bodka. V citáciách treba uviesť všetkých autorov. Nedávať skratku „et al“.

Kvôli uverejňovaniu autodidaktických testov je potrebné k Vášmu prehľadnému článku dodať 4 otázky a k nim po 4 odpovede s vyznačením jednej správnej odpovede, napr.:

Ktorý z nasledujúcich faktorov nesúvisí s rosaceou?
a. genetická predispozícia
b. škandinávsky pôvod
c. propionibacterium acnes
d. endotelialny rastový faktor

Redakcia si vyhradzuje právo robiť drobné štylistické úpravy rukopisu. V prípade potreby skrátenia rukopisu bude vyžiadaný súhlas autora. Všetky články sú recenzované.

Všetky uverejnené príspevky sú honorované.

Vzhľadom k praktickému zameraniu časopisu Vás prosíme, aby bol príspevok napísaný zrozumiteľne, s dôrazom na praktické využitie podaných informácií v ambulantnej praxi pediatrov.

Príspevky posielajte e-mailom na adresu: stachova@amedi.sk